Dos fragmentos recombinantes derivados de la proteína secretada con dominio de repetición de trombospondina alterado (SPATR) de Plasmodium vivax interactúan con reticulocitos, pero no con células hepáticas humanas

Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International (CC BY-NC-ND 4.0)Arévalo Pinzón, GabrielaCárdenas Carpeta, Andrés Felipe2022-04-292022-04-292021-11-23http://repositorio.uan.edu.co/handle/123456789/6371The Plasmodium human invasion cycle involves many proteins enabling it to interact with and invade host cells. Recent studies in species such as Plasmodium falciparum have shown that the secreted protein with altered thrombospondin repeat (SPATR) protein is expressed in sporozoites and merozoites, is antigenic and essential for the invasion of erythroid and liver cells. However, little is known about its host cell binding activity in Plasmodium vivax, one of the most widely-distributed parasites worldwide. This work has thus been focused on determining two PvSPATR recombinant fragments’ human hepatocyte and reticulocyte binding activity. Bl21-AI cells transformed from recombinant plasmids containing two PvSPATR fragments’ encoding sequences were used for expressing rPvSPATR-F1 and rPvSPATR-F2 and then purified by affinity chromatography. rPvSPATR-F1 and rPvSPATRF2 binding to human hepatocytes and reticulocytes was quantified by flow cytometry. Both recombinant regions only interacted with human reticulocytes, suggesting PvSPATR participation in receptor-ligand type interactions during the erythrocyte stage and that these regions could be targets of action for preventing this disease.El ciclo de invasión de Plasmodium al ser humano involucra un alto número de proteínas que le permiten interactuar e invadir a las células hospederas. Recientes estudios en especies como Plasmodium falciparum han mostrado que la proteína SPATR se expresa en el esporozoito y merozoito, es antigénica y esencial para la invasión a células eritroides y hepáticas. Sin embargo, poco se conoce sobre su actividad de unión a células hospederas en Plasmodium vivax, uno de los parásitos con mayor distribución a nivel mundial. Por lo tanto, el presente trabajo se enfocó en determinar la actividad de unión de dos fragmentos recombinantes de PvSPATR a hepatocitos y reticulocitos humanos. A partir de plásmidos recombinantes que contenían las secuencias codificantes para dos fragmentos de la proteína PvSPATR, se transformaron células Bl21-AI que fueron utilizadas para la expresión de rPvSPATR-F1 y rPvSPATR-F2. Una vez expresadas ambos fragmentos, estos fueron purificados por cromatografía de afinidad. La unión de las proteínas rPvSPATR-F1 y rPvSPATR-F2 a hepatocitos y a reticulocitos humanos fue cuantificada por citometría de flujo. Los resultados mostraron que las dos regiones recombinantes interactuaron solo con reticulocitos humanos, sugiriendo la participación de PvSPATR en interacciones del tipo receptor-ligando en el estadio eritrocítico y sugiriendo estas regiones como posibles blancos de acción para prevenir esta enfermedad.spaAcceso abiertoMalariaPlasmodium vivaxReceptor-ligandoProteínas recombinantes540Dos fragmentos recombinantes derivados de la proteína secretada con dominio de repetición de trombospondina alterado (SPATR) de Plasmodium vivax interactúan con reticulocitos, pero no con células hepáticas humanasTrabajo de grado (Pregrado y/o Especialización)MalariaPlasmodium vivaxLigand-receptorRecombinant proteinsinfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Acosta Muñoz, L. M., & Arias García, L. N. (2020). Clonación y expresión de dos fragmentos de la proteína Spatr de plasmodium vivax en el sistema Escherichia coli. 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